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terça-feira, 17 de dezembro de 2024

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As condições que podem ter desencadeado a vida na Terra


Os cientistas acreditam que estão a começar a compreender as condições que originaram a vida na Terra , demonstrando em laboratório uma multiplicação massiva de ADN em poucos minutos.

Há mais de 4 mil milhões de anos, os compostos químicos juntaram-se para formar a vida .

Este evento ocorreu quando a Terra era muito jovem – apenas algumas centenas de milhões de anos. Na época, a Terra estava sendo bombardeada por asteroides. Grande parte da superfície estava derretida. Esta primeira parte da história do nosso planeta é apropriadamente chamada de Hadean, em homenagem ao antigo deus grego dos mortos e rei do submundo.

Conceito artístico mostrando como a superfície da Terra apareceu durante o éon Hadean
Conceito artístico mostrando como a superfície da Terra apareceu durante o éon Hadeano. Crédito: Stocktrek Images / Stocktrek Images / Getty Images Plus.

Mas o Hadeano também viu o desenvolvimento – depois que a Terra esfriou – da nossa atmosfera e dos oceanos. Foi nestes primeiros oceanos que os cientistas teorizam que a “sopa primordial” de compostos químicos à base de carbono se reuniu pela primeira vez para formar os blocos de construção da vida.

Quais condições permitiram que esse processo ocorresse permaneceram um mistério.

Uma nova pesquisa publicada na revista eLife descreve evidências que sugerem que um simples cenário geofísico poderia ter levado aos blocos de construção da vida.

Um fluxo de gás através de um canal estreito de água pode criar um ambiente físico, dizem os investigadores, que leva à replicação de ácidos nucleicos – as biomoléculas de armazenamento de informação que constituem o ADN e o ARN.

A vida não precisa apenas da replicação do ácido nucléico. Também exige que as cadeias de ARN se separem novamente após o processo de replicação – algo que é difícil dadas as condições necessárias para a replicação em primeiro lugar.

“Vários mecanismos foram estudados quanto ao seu potencial para separar cadeias de DNA na origem da vida, mas todos eles exigem mudanças de temperatura que levariam à degradação dos ácidos nucléicos”, diz o autor principal Philipp Schwintek, Ph.D. estudante da Ludwig-Maximilians-Universität München, Alemanha.

“Investigamos um cenário geológico simples e onipresente, onde o movimento da água através de um poro da rocha era seco por um gás que percolava através da rocha para chegar à superfície”, explica Schwintek. “Tal cenário seria muito comum em ilhas vulcânicas da Terra primitiva, que ofereciam as condições secas necessárias para a síntese de RNA.”

Diagrama mostrando o fluxo de gás, água, rocha porosa, ácido nucleico
Replicação na interface gás-água. Consideramos um cenário geológico em que a água, contendo biomoléculas, é evaporada por um fluxo de gás na escala de milímetros. Nas rochas vulcânicas porosas, muitas dessas configurações podem ser imaginadas. 
 
O fluxo de gás induz correntes convectivas de água e faz com que ela evapore. Os ácidos nucleicos e sais dissolvidos acumulam-se na interface gás-água devido às correntes interfaciais, mesmo que o influxo vindo de baixo seja água pura. Através do vórtice induzido, os ácidos nucleicos passam por diferentes concentrações de sal, promovendo a separação das cadeias e permitindo-lhes replicar-se exponencialmente. Nossos experimentos replicam esse ambiente em microescala, submetendo um volume de amostra definido a um influxo contínuo de água pura com um fluxo de ar passando. Crédito: eLife (2024). DOI: 10.7554/eLife.100152.1

A equipe descobriu o processo construindo um modelo de laboratório de um cenário antigo na Terra com poros rochosos, fluxo de água e fluxo de gás.

Eles encontraram um acúmulo de fitas de DNA na interface entre a água e o gás.

Em 5 minutos, havia 3 vezes mais DNA do que no início do experimento. Depois de uma hora, a quantidade de DNA se multiplicou por 30.

quinta-feira, 9 de junho de 2022

 

Síntese Catalítica de Ácido Polirribonucleico em Vidros de Rocha Prebiótica

Publicado online: https://doi.org/10.1089/ast.2022.0027

Resumo

São relatados aqui experimentos que mostram que trifosfatos de ribonucleosídeos são convertidos em ácido polirribonucleico quando incubados com vidros de rocha semelhantes aos provavelmente presentes 4,3 a 4,4 bilhões de anos atrás na superfície da Terra Hadeana, onde foram formados por impactos e vulcanismo. Este ácido polirribonucleico tem em média 100-300 nucleotídeos de comprimento, com uma fração substancial de ligações 3',-5'-dinucleotídeos. Análises químicas, incluindo métodos clássicos que foram usados ​​para provar a estrutura do RNA natural, estabelecem uma estrutura de ácido polirribonucleico para esses produtos. O ácido polirribonucleico se acumulou e permaneceu estável por meses, com uma taxa de síntese de 2 × 10 −3 pmoles de trifosfato polimerizado a cada hora por grama de vidro (25°C, pH 7,5). Esses resultados sugerem que os polirribonucleotídeos estavam disponíveis para os ambientes Hadeanos se os trifosfatos estivessem. Como muitas propostas estão surgindo descrevendo como os trifosfatos podem ter sido feitos na Terra Hadeana, o processo observado aqui oferece uma importante etapa que falta em modelos para a síntese prebiótica de RNA.

1. Introdução

Um episódio inicial da vida na Terra provavelmente usou o RNA em papéis genéticos e catalíticos (o “Mundo do RNA”) (White, 1976 ; Gilbert, 1986 ). Isso sugere, mas não exige (Hud et al. , 2013 ), um “Modelo RNA-Primeiro” para a origem da vida na Terra, proposto há 60 anos por Alexander Rich (Rich, 1962 ).

No entanto, a estrutura do RNA, uma vez chamada de “pesadelo de um químico prebiótico” (Joyce e Orgel, 1999 ), é vista por muitos como complexa demais para ter surgido espontaneamente (Shapiro, 2007 ). Assim, um caso persuasivo para o RNA-First Model requer, no mínimo (Robertson e Joyce, 2012 ), uma demonstração experimental de um processo abiológico que forma moléculas de RNA oligoméricas com comprimentos suficientes para suportar a evolução darwiniana (Krishnamurthy, 2015 ), talvez 50-5000 nucleotídeos (Joyce, 2012 ). Além disso, este processo deve funcionar sem intervenção humana em um ambiente provável de ter sido encontrado durante o Hadeano.

As rochas disponíveis na superfície hadeana provavelmente foram impulsionadas pelo estado redox do manto hadeano, que provavelmente não estava longe dos valores modernos (Harrison, 2009 ; Trail et al. , 2011 ). 

A superfície provavelmente foi retrabalhada pelo bombardeio que derreteu seus materiais principalmente máficos (basálticos e diabásicos) (Pierazzo e Melosh, 2000 ; Arndt e Nisbet, 2012 ; Mojzsis et al. , 2019 ). Isso, por sua vez, gerou silicatos criptocristalinos temperados com água e ar (em linguagem comum, vidros ) com a composição diversa da crosta inicial (Melosh, 1989 ).

À luz desse contexto geológico, perguntamos se os vidros máficos poderiam converter ribonucleosídeos 5'-trifosfatos em ácido polirribonucleico. Informamos aqui que podem.

2. Resultados

Amostras de vidro padrão, obtidas a partir de óxidos puros pelos métodos usados ​​no United States Geological Survey (USGS), tinham a composição de andesito (AGV), basalto (BRP), gabro (GSM), diabásio (MRM) e nefelinita (NKT) (Le Maître et al. , 1989 ). As Tabelas Suplementares S1–S5 resumem suas composições. O pó de quartzo fundido foi usado como referência.

Amostras de vidro (22 mg) foram incubadas (pH 7,5, 25°C, 20 h) com água contendo uma mistura de todos os quatro ribonucleosídeos trifosfatos (NTPs 3 μM final cada, radiomarcador introduzido como [α- 32 P]GTP). Os sobrenadantes e eluatos obtidos por tratamento com ureia foram então recolhidos. A análise dos materiais dissolvidos em ambos, feita por eletroforese em gel de poliacrilamida desnaturante (PAGE), mostrou duas classes de produtos ( Fig. 1 ):

FIGO.  1.

FIGO. 1. Polimerização de NTPs em vidro diabase. Incubação de todos os quatro trifosfatos de nucleosídeos (3 μM cada, com [α- 32 P] GTP) em cinco tipos de vidro (22 mg) por 20 h, 25°C. Os sobrenadantes da reação (Sup) e as lavagens de ureia (ureia) para cada vidro foram carregados em um PAGE desnaturante a 20%. H 2 O: reação de controle na ausência de vidro. NEPETop - OH: hidrólise alcalina parcial de uma molécula de RNA 14-mer. Os tamanhos em nucleotídeos estão à esquerda. AGV, andesito; BRP, basalto; GSM, gabro; MRM, diabásio; NKT, nefelinita.

  • (a) Produtos de migração rápida, que foram entregues por todos os vidros. Estes resistiram à degradação de RNase ONE™ durante 18 h ( Fig. Suplementar S18 ), excluindo uma estrutura de ácido polirribonucleico linear ligado a 3',5' para estas espécies de migração rápida. Sua possível estrutura não é discutida aqui, mas espécies semelhantes foram vistas em outros trabalhos pioneiros (Rajamani et al. , 2008 ; Costanzo et al. , 2009 , 2016 ; Sponer et al. , 2016 ).

  • (b) Produtos de migração lenta, que eram produzidos por óculos BRP, GSM e MRM. Os outros vidros produziram menos deste material. O quartzo não produziu nenhum, e nenhum foi formado pela incubação de trifosfatos em água sem qualquer vidro ( Fig. Suplementar S8 e outros).

Para análises subsequentes, focamos em produtos encontrados nos sobrenadantes da reação de oligomerização em equilíbrio, deixando espécies potencialmente fortemente adsorvidas para estudos futuros.

Os produtos do tipo (b) também foram formados a partir de ATP, CTP, GTP e UTP incubados separadamente (3 μM, alfa 32P -label; Fig Suplementar S6 ). Mais uma vez, os óculos MRM e BRP forneceram estes em quantidades substanciais. Os vidros NKT e AGV foram menos produtivos. O quartzo era totalmente improdutivo ( Figs. Suplementares S7-S10 , painéis à direita).

Concentrando-se no vidro MRM “produtivo”, as quantidades de produtos radiomarcados de migração lenta aumentaram de forma constante com o tempo, ao longo dos dias ( Fig. 2 ). A incubação com maiores quantidades de NTPs (30–360 pmoles) aumentou as taxas de produção ( Fig. S3 suplementar ), sugerindo que os vidros atuam como verdadeiros catalisadores.

FIGO.  2.

FIGO. 2. Tempo de polimerização de trifosfato em vidro diabase. Esquerda: Curso de tempo seguido por PAGE (20%, 7 M de ureia) usando [α- 32 P]GTP marcado. Os tempos de incubação nas pistas são indicados como minutos (′) e horas (h). As escadas são de hidrólise parcial de um RNA marcado com 5' 14-mer (esquerda) e 31-mer (direita); comprimentos de fragmentos estão em nucleotídeos. Os números codificados por cores correspondem ao gráfico, mostrando o cpm incorporado em função do tempo para as 10 bandas. As velocidades iniciais em pmoles/min refletem o material formado por miligrama de vidro, calculado a partir da atividade específica do GTP marcado. As leituras de contagem de cintilação foram realizadas em triplicado para cada banda em experimentos cinéticos duplicados. As barras de erro representam a média de seis valores. cpm, contagens por minuto.

Para estabelecer a catálise, os experimentos foram executados por 20, 33 e 41 dias (pH 7,5, 25°C) com vidro MRM e todos os quatro NTPs (3 μM cada, com [α- 32 P]GTP) ( Fig. 2 ; Suplementar Fig. S4 ). Mesmo depois de meses, a síntese do material de migração lenta [produtos do tipo (b)] continuou. Acumulações semelhantes foram observadas para BRP e GSM. Novamente, os vidros NKT e AGV deram muito poucos produtos do tipo (b), e mais lentamente. O quartzo continuou a não produzir tais produtos, mesmo após meses ( Fig. S5 suplementar ).

A linearidade do processo ao longo do tempo e sua dependência do tipo específico de vidro excluem a “catálise superficial generalizada”. Esses e outros experimentos também excluem outros artefatos. Assim, a progressão do tempo exclui a possibilidade de que os materiais de alto peso molecular observados por PAGE sejam agregados não covalentes. Para excluir a possibilidade de que os vidros “vazaram”, espécies desconhecidas que retardaram artificialmente a eletroforese de RNA curto, rC 12 marcado com 5' e rA 12 foram incubados em sobrenadantes de vidro MRM previamente incubados em água por 6 meses, e eletroforese. Não foram produzidos produtos de migração lenta do tipo (b) ( Fig. S24 Suplementar ).

Várias avaliações independentes dos produtos de migração lenta confirmam que os nucleotídeos nos produtos do tipo (b) estavam ligados covalentemente. Especificamente, a mistura completa do produto do vidro MRM foi passada pelos ultrafiltros Amicon™ com limites de tamanho crescentes. A maioria dos produtos de alto peso molecular [tipo (b)] foram retidos por filtros de 30-50 kDa. Aproximadamente 25% foram retidos por filtros de 100 kDa ( Fig. 3 ). Isso corresponde ao que seria esperado de ácidos polirribonucleicos que têm um comprimento de 90 a 300 nucleotídeos.

FIGO.  3.

FIGO. 3. Ultrafiltração do ácido polirribonucleico formado no diabase. São mostrados o material de partida (S), eluatos de filtro (E) e retentados de filtro (R) com filtros MWCO crescentes. K = kDa. NEPETop e 31RA: hidrólise alcalina parcial de moléculas de RNA 14-mer e 31-mer. Os tamanhos em nucleotídeos estão nas laterais. Vinte por cento PAGE, 7M de ureia. MWCO, corte de peso molecular.

Agregados não covalentes também foram excluídos realizando ultrafiltração na presença de ácido fórmico (0,005%, pH 3), etanol a 15% ou ambos. Alterar o pH e adicionar solventes orgânicos romperia agregados não covalentes unidos por ligações de hidrogênio e/ou forças hidrofóbicas ( Tabela 1 ). Isso também exclui ligações fosforamidita, onde o fosfato está ligado a uma base nitrogenada; tais ligações não são estáveis ​​em pH baixo e não estariam disponíveis em nenhum caso para o ácido poliuridílico. Em seguida, 10 frações separadas que representavam todas as bandas do produto foram recuperadas dos géis e recorridas separadamente em PAGE. A mobilidade eletroforética de cada material não foi alterada ( Fig. Suplementar S15 ).

Tabela 1. Ultrafiltração de Ácidos Polirribonucleicos Feitos em Diabase

Amostra Tratamento Retido Eluído Total Retido Eluído
cpm cpm cpm % %
Diabase Água 23,329 66,179 89,508 26.06 73.94
EtOH 6247 55,503 61,750 10.12 89.88
pH 3,0 12,669 76,100 88,769 14.27 85.73
EtOH + pH 3,0 12,968 77,327 90,295 14.36 85.64
Quartzo Água 12,390 53,172 65,562 18.90 81.10
EtOH 2984 65,773 68,757 4.34 95.66
pH 3,0 1969 64,870 66,839 2.95 97.05
EtOH + pH 3,0 821 67,109 67,930 1.21 98.79
Água Água 12,756 36,764 49,520 25.76 74.24
EtOH 1499 49,222 50,721 2.96 97.04
pH 3,0 872 46,775 47,647 1.83 98.17
EtOH + pH 3,0 939 47,900 48,839 1.92 98.08

Os valores em negrito destacam o material retido acima dos filtros.

O texto em negrito destaca o tratamento com ambos os agentes desagregadores.

Cpm de radiação e porcentagens (%) de radiação em material retido e eluído em NTPs incubados com diabase, quartzo ou água após tratamento com vários agentes desagregantes seguido de ultrafiltração através de filtros MWCO de 10 kDa.

cpm = contagens por minuto; EtOH = etanol; MWCO = corte de peso molecular; NTPs = trifosfatos de ribonucleosídeos.

Além disso, quando os produtos de oligomerização foram analisados ​​por PAGE com diferentes porcentagens ( Fig. Suplementar S11 ), os produtos de alto peso molecular se comportaram como esperado, rodando mais rápido em PAGE de baixa porcentagem e mais lento em PAGE de alta porcentagem. Em contraste, os produtos de baixo peso molecular seguiram a tendência oposta: sua migração diminuiu com o aumento porcentagem de gel. Este comportamento do tipo de ácido nucleico suporta ainda a nossa atribuição estrutural dos produtos de migração lenta, mas não dos produtos de migração rápida, como cadeias de ácido polirribonucleico ligadas covalentemente.

Reconhecendo a importância deste resultado para o “RNA-First Model” para a origem da vida, estabelecemos então que o material de alto peso molecular era um polímero de ribonucleotídeos. Essa prova de estrutura usou praticamente as mesmas ferramentas usadas para provar originalmente a estrutura do RNA natural há 70 anos.

Primeiro, o material de alto peso molecular [produtos do tipo (b)] foi obtido em grandes quantidades por uma incubação de 8 meses com vidro MRM com não radioativos. Isso foi classicamente analisado. Os precursores de nucleosídeos 5'-fosforilados residuais transportados da incubação foram primeiro removidos por tratamento de amostras com NaIO 4 (10 mM, 30 min, depois pinacol para remover o excesso de periodato; Muthukumaran et al. , 2005 ). Os materiais foram então digeridos com amoníaco concentrado (ver, por exemplo , análises de ligações responsáveis ​​por hidrólise alcalina nas Figs. S12-S14 Suplementares ).

A mistura de produtos de hidrólise foi liofilizada e então resolvida por cromatografia líquida de alta eficiência de fase reversa (HPLC). HPLC mostrou que este material continha nucleosídeos 2'- e 3'-monofosfatos. Estes foram quantificados por espectroscopia UV e autenticados por comparação com padrões sintéticos ( Fig. 4 ; Figs. Suplementares 19-23 ; Tabela Suplementar S8 ).

FIGO.  4.

FIGO. 4. HPLC 3D-Diode Array de produtos obtidos por hidrólise de amônia de ácido polirribonucleico sintetizado em vidro diabase. (A) Produtos hidrolisados ​​de oligomerização para ácido polirribonucleico feito de todos os quatro nucleotídeos padrão. (B) Mistura de controle de monofosfato de 2' e 3'-nucleotídeo. As atribuições de pico foram confirmadas por corridas de HPLC de NMPs tratadas e não tratadas e por perfis de espectro correspondentes para controlos e amostras ( Figs. Suplementares S19 e S20 , e dados não apresentados). O maior pico em [A] correndo em ~6 min, resultante da degradação do material de entrada de ATP, mascara os picos de 2' e 3'UMP. A presença de linhas correspondentes aos picos de UMP pode ser detectada na vista 3D ( Fig. Suplementar S22 ) e foi confirmada com a análise de reações de oligomerização de UTP de um único nucleótido ( Fig. Suplementar S23 ). Os picos da extrema esquerda em [A] vêm de nucleosídeos de anel aberto residuais de HPLC anterior (seção de Métodos em Dados ; Fig. Suplementar S19 ). As vistas inclinadas para a direita e frontais são mostradas em Figura Suplementar S21 . Sombreamento de cor é adicionado para dar ênfase.

A recuperação de monofosfatos 2' e 3'-nucleosídeos de produtos cuja única entrada nucleotídica era nucleosídeo 5'-fosfatos estabelece que o polímero envolveu uma nova ligação fosfodiéster entre dois nucleotídeos. Nenhuma outra estrutura de produto é responsável por esses dados.

Essa ligação deve ser um fosfodiéster entre o 5'-OH de um nucleotídeo (a ligação nucleosídeo-OP original) e o 3'-OH de outro, ou entre o 5'-OH de um nucleotídeo e o 2'-OH de outro. Esta experiência não distingue qual, à medida que a digestão de amoníaco do ácido polirribonucleico prossegue através de monofosfatos 2',3'-cíclicos de nucleósidos ( Fig. Suplementar S12 ). Assim, a proporção de nucleosídeos 2'- e 3'-monofosfatos é independente da proporção de ligações 2',5' e 3',5'-fosfodiéster no ácido polirribonucleico digerido. No entanto, esses produtos de monofosfato não podem ocorrer sem que o vidro tenha catalisado o ataque do 2'-OH ou do 3'-OH no alfa fosfato do trifosfato de partida. Esta observação é significativa independentemente de qual grupo hidroxila estava envolvido.

Para provar que o ácido polirribonucleico sintetizado em vidro tinha muitas ligações 3',5'-fosfodiéster, o ácido polirribonucleico produzido pela catálise do vidro foi digerido com várias enzimas ribonuclease que são específicas para ligações 3',5'. O tratamento com Ribonuclease ONE™ (Promega) não deixou material de alto peso molecular ( Fig. 5 ). Isso estabeleceu que o ácido polirribonucleico tipo (b) contém uma proporção substancial de ligações 3',5' entre ribonucleotídeos em uma estrutura linear. Esses dados não excluem, é claro, algumas ligações 2',5' ou algumas ramificações.

FIGO.  5.

FIGO. 5. Digestões Ribonuclease ONE™ de ácido poyribonucleico em forma de vidro de diabase. Curso de tempo de digestões Ribonuclease ONE de produtos de oligomerização em diabase para trifosfatos de nucleotídeo único (A, C, G, U) e uma mistura dos quatro (NTPs). NEPETop e 31RA: hidrólise alcalina parcial de moléculas de RNA 14-mer e 31-mer. Os tamanhos em nucleotídeos estão nas laterais. Vinte por cento PAGE, 7 M de ureia.

Expandindo este resultado, cada amostra de ácido polirribonucleico purificado em gel, bem como os materiais de baixo peso molecular, foi incubada separadamente com RNase ONE ( Figs. Suplementares S16 e S18 ), RNase A (CTP, UTP e amostras de NTPs mistos; Fig. S17 suplementar , painel esquerdo) e RNase T1 (amostras de GTP e NTPs mistos; Fig. S17 suplementar , painel direito). Todas as RNases digeriram os produtos de alto peso molecular, mas não os produtos de baixo peso molecular.

Em seguida, perguntamos com que rapidez o vidro MRM catalisava a formação de ácido polirribonucleico (métodos detalhados em Dados Suplementares ). O ácido polirribonucleico radiomarcado foi recolhido em intervalos de tempo e resolvido por PAGE ( Fig. 2 ). Contagem de cintilação quantificada em bandas cortadas do gel (contagens por minuto [cpm] normalizadas para cpm total carregada, atividade específica do trifosfato de partida e ajustada para decaimento). Os produtos foram analisados ​​em nove bandas, abrangendo os oito produtos de migração rápida (não ácido polirribonucleico) e os produtos de migração lenta.

A taxa de incorporação de 32 P-GTP em ácido polirribonucleico (banda 1) foi de 2 × 10 −3 pmoles/hora por grama de vidro MRM; a taxa de incorporação na banda 8 ( não ácido polirribonucleico) foi de 4,9 × 10 −3 pmoles/hora por grama de vidro. Os vidros GSM e BRP apresentaram taxas de incorporação semelhantes para a banda 1 (∼0,6 e 1,8 × 10 −4 pmole/hora por grama de vidro). Os vidros NKT e AGV produziram taxas <10 −5 pmole/hora por grama de vidro. O pó de quartzo puro não produziu ácido polirribonucleico detectável.

A diversidade de sequências de ácido polirribonucleico foi então avaliada. Os produtos das incubações com vidro MRM foram analisados ​​com diferentes combinações de trifosfatos: [α- 32 P]CTP sozinho, com ATP, com UTP, com GTP, com ATP e com UTP em misturas binárias, com ATP e GTP, GTP e UTP como misturas ternárias, e com todos os quatro trifosfatos de nucleosídeos. Combinações análogas foram examinadas com [α- 32P ]GTP, [α- 32P ]ATP e [α- 32P ]UTP. Todos os nucleótidos parecem incorporar bem ( Fig. Suplementar S10 ). GTP e CTP podem ser modestamente preferidos como substratos para a formação catalisada por MRM de sequências de ácido polirribonucleico. No entanto, essa preferência não é grande.

3. Discussão

Este estudo mostra que vários vidros de rocha máfica quase certamente presentes na superfície da Terra Hadeana catalisam a formação de ácido polirribonucleico em água a partir de trifosfatos de nucleosídeos. Tanto a eletroforese em gel quanto a ultrafiltração mostram que esse ácido polirribonucleico tem, em média, 90 a 150 nucleotídeos de comprimento. Moléculas de RNA desse comprimento são suficientemente longas para participar de vários processos laboratoriais que lembram o darwinismo baseado em RNA (Attwater et al. , 2013 ; Horning e Joyce, 2016 ; Joyce e Szostak, 2018 ; Horning et al. , 2019 ; Wachowius e Holliger, 2019 ).

Os experimentos de digestão enzimática provam que uma fração substancial das ligações no ácido polirribonucleico “prebiótico” são 3',5'. No entanto, esses experimentos não podem excluir a presença de ligações 2',5', nem alguma quantidade de ramificação. O mais surpreendente seria produtos em que as ligações não misturadas.

Não obstante, a robustez da função em polirribonucleotídeos com ambas as ligações continua sendo um importante ponto de discussão. Assim, Rohatgi et al. ( 1996 ) relataram que as ligações 2',5' no RNA de fita simples hidrolisam em pH 7 ~ 3 vezes mais rápido do que as ligações 3',5'. Outros sugeriram que as ligações 2',5' podem "curar" para ligações 3',5', ou ser formadas seletivamente devido a diferenças de pKa (Usher e McHale, 1976 ; Englehart et al. , 2013 ; Mariani e Sutherland, 2017 ).

Em qualquer caso, o processo é catalítico. A síntese de ácido polirribonucleico continua ao longo do tempo, os produtos se acumulam ao longo de meses e o processo não consome o vidro. Além disso, o processo ocorre sob condições em que o ácido polirribonucleico é estável, especialmente contra a depurinação (Mungi et al. , 2019 ). Dados cinéticos sugerem que uma pequena região de impacto na superfície hadeana contendo apenas algumas toneladas métricas de vidro fraturado e permeado de água poderia ter a capacidade de produzir cerca de um grama de RNA por dia, limitado (é claro) pelo fornecimento de trifosfatos.

Assim, a relevância prebiótica deste resultado depende muito da presença de trifosfatos de nucleosídeos nos campos de impacto hadeano. Modelos para criar partes e ligações dentro desses nucleosídeos, bem como trifosfatos de nucleosídeos completos, estão avançando em muitos laboratórios (Kim et al. , 2011 , 2016 ; Neveu et al. , 2013 ; Xu et al. , 2018 ; Becker et al. , 2019 ; Benner et al. , 2019 ; Castaneda et al. , 2019 ; Kawai et al. , 2019 ; Kim e Kim, 2019 ; Kim e Benner, 2021 ). Se os trifosfatos estivessem disponíveis, os vidros máficos na superfície da Terra Hadeana (e no Marte de Noé) poderiam fornecer uma peça que faltava no quebra-cabeça “RNA Primeiro”.

Contribuições dos autores

EB esteve envolvido na conceituação, metodologia, validação, análise formal, investigação, preparação do rascunho original, revisão e edição, visualização, supervisão e administração do projeto. A SAB esteve envolvida na conceituação, metodologia, análise formal, preparação do rascunho original, revisão e edição, visualização, supervisão, administração do projeto e aquisição de financiamento. SJM esteve envolvido na conceituação, recursos e revisão e edição. HJK esteve envolvido na metodologia e na análise formal. CAJ esteve envolvido na investigação e análise formal.

Agradecimentos

Agradecemos a Stephen A. Wilson (USGS) e Nigel M. Kelly (Universidade de Colorado Boulder; Bruker Nanoanalytics) pela assistência com os vidros de rocha, e Valerio Leone Sciabolazza (Universidade de Nápoles) pelas estatísticas de composição do vidro.

Disponibilidade de dados e materiais

Não houve restrições de materiais ou dados. Todos os dados estão disponíveis no texto principal ou Dados Suplementares .

Declaração de divulgação do autor

Não existem interesses financeiros concorrentes.

Informações de financiamento

O material é baseado em estudo apoiado pela NASA sob o prêmio nº 80NSSC18K1278. Quaisquer opiniões, descobertas e conclusões ou recomendações expressas neste material são de responsabilidade do(s) autor(es) e não refletem necessariamente as opiniões da Administração Nacional de Aeronáutica e Espaço. Esta publicação também foi possível graças ao apoio de uma doação da John Templeton Foundation, 54466. As opiniões expressas nesta publicação são de responsabilidade dos autores e não refletem necessariamente as opiniões da John Templeton Foundation.

Material suplementar

Dados suplementares

Figuras Suplementares S1–S24

Tabelas Suplementares S1–S8

Abreviaturas usadas
AGV

andesito

BRP

basalto

cpm

conta por minuto

GSM

gabro

MRM

diabásio

MWCO

corte de peso molecular

NKT

nefelinita

NTPs

trifosfatos de ribonucleosídeos.

PÁGINA

eletroforese em gel de poliacrilamida

 

Os "óculos" vulcânicos ajudaram a desencadear a vida precoce?

Lava extinta pode ter ajudado a formar longas cadeias de RNA necessárias para organismos primordiais

  • 09 de junho de 2022
Uma fonte termal ao pôr do sol perto da fonte termal da Lagoa Azul na Islândia
O vidro vulcânico, como o encontrado perto da Lagoa Azul da Islândia, pode ajudar a tricotar letras de RNA em longos fios. Suranga Weeratuna/Alamy Stock Photo

Quando a vida surgiu, foi tão rápido. Os fósseis sugerem que os micróbios estavam presentes há 3,7 bilhões de anos, apenas algumas centenas de milhões de anos depois que o planeta de 4,5 bilhões de anos esfriou o suficiente para suportar a bioquímica, e muitos pesquisadores pensam que o material hereditário para esses primeiros organismos era o RNA

 Embora não seja tão complexo quanto o DNA, o RNA ainda seria difícil de forjar nas longas cadeias necessárias para transmitir informações genéticas, levantando a questão de como ele poderia ter se formado espontaneamente.

Agora, os pesquisadores podem ter uma resposta. Em experimentos de laboratório, eles mostram como rochas chamadas de vidros basálticos ajudam letras individuais de RNA, conhecidas como trifosfatos de nucleosídeos, a se ligarem em cadeias de até 200 letras. Os vidros teriam sido abundantes no fogo e enxofre da Terra primitiva; eles são criados quando a lava é extinta no ar ou na água ou quando a rocha derretida criada em ataques de asteroides esfria rapidamente.

O resultado dividiu os principais pesquisadores da origem da vida. “Esta parece ser uma história maravilhosa que finalmente explica como os trifosfatos de nucleosídeos reagem uns com os outros para dar cadeias de RNA”, diz Thomas Carell, químico da Universidade Ludwig Maximilian de Munique. Mas Jack Szostak, especialista em RNA da Universidade de Harvard, diz que não acreditará no resultado até que a equipe de pesquisa caracterize melhor as fitas de RNA.

Os pesquisadores da origem da vida gostam de um “mundo de RNA” primordial porque a molécula pode realizar dois processos distintos vitais para a vida. Como o DNA, é composto de quatro letras químicas que podem carregar informações genéticas. E como as proteínas, o RNA também pode catalisar reações químicas necessárias para a vida.

Mas o RNA também traz dores de cabeça. Ninguém encontrou um conjunto de condições prebióticas plausíveis que fariam com que centenas de letras de RNA – cada uma delas moléculas complexas – se ligassem em filamentos longos o suficiente para sustentar a química complexa necessária para desencadear a evolução.

Stephen Mojzsis, geólogo do Centro de Pesquisa em Astronomia e Ciências da Terra da Academia Húngara de Ciências , questionou se os vidros basálticos desempenharam um papel. Eles são ricos em metais como magnésio e ferro que promovem muitas reações químicas. E, diz ele, “o vidro basáltico estava em toda parte na Terra na época”.

Ele enviou amostras de cinco vidros de basalto diferentes para a Foundation for Applied Molecular Evolution. Lá, Elisa Biondi, bióloga molecular, e seus colegas moeram cada amostra em um pó fino, esterilizaram e misturaram com uma solução de trifosfatos de nucleosídeos. Sem um pó de vidro presente, as letras de RNA não conseguiram se conectar. Mas quando misturadas com os pós de vidro, as moléculas se juntaram em longos fios , com algumas centenas de letras, relatam os pesquisadores esta semana na revista Astrobiology . Nenhum calor ou luz era necessário. “Tudo o que tivemos que fazer foi esperar”, diz Biondi. Pequenas fitas de RNA se formaram após apenas um dia, mas as fitas continuaram crescendo por meses. “A beleza deste modelo é sua simplicidade”, diz Jan Špaček, biólogo molecular da Firebird Biomolecular Sciences. “Misture os ingredientes, espere alguns dias e detecte o RNA.”

Ainda assim, os resultados levantam muitas questões. Uma é como os trifosfatos de nucleosídeos podem ter surgido em primeiro lugar. O colega de Biondi, Steven Benner, diz que pesquisas recentes mostram como os mesmos vidros basálticos poderiam ter promovido a formação e estabilização das letras de RNA individuais.

Um problema maior, diz Szostak, é a forma das longas fitas de RNA. Nas células modernas, as enzimas garantem que a maioria dos RNAs cresça em longas cadeias lineares. Mas as letras de RNA também podem se ligar em padrões complexos de ramificação. Szostak quer que os pesquisadores relatem o tipo de RNA que os vidros basálticos criaram. “Acho muito frustrante que os autores tenham feito uma descoberta inicial interessante, mas depois decidiram seguir o hype em vez da ciência”, diz Szostak.

Biondi admite que o experimento de sua equipe quase certamente produz uma pequena quantidade de ramificação de RNA. No entanto, ela observa que alguns RNAs ramificados existem em organismos hoje, e estruturas relacionadas podem estar presentes no início da vida. Ela também diz que outros testes que o grupo realizou confirmam a presença de longos fios com conexões que provavelmente significam que são lineares. “É um debate saudável”, diz Dieter Braun, químico de origem da vida da Ludwig Maximilian. “Isso desencadeará a próxima rodada de experimentos.”

Correção, 6 de junho, 16h: Uma versão anterior desta história deturpou a afiliação de Stephen Mojzsis.

sexta-feira, 8 de junho de 2018

Earth Had Oxygen Much Earlier Than Thought


Earth Had Oxygen Much Earlier Than Thought

Oxygen may have filled Earth's atmosphere hundreds of millions of years earlier than previously thought, suggesting that sunlight-dependent life akin to modern plants evolved very early in Earth's history, a new study finds.

The findings, detailed in the Sept. 26 issue of the journal Nature,have implications for extraterrestrial life as well, hinting that oxygen-generating life could arise very early in a planet's history and potentially suggesting even more worlds could be inhabited around the universe than previously thought, the study's authors said.

It was once widely assumed that oxygen levels remained low in the atmosphere for about the first 2 billion years of Earth's 4.5-billion-year history. Scientists thought the first time oxygen suffused the atmosphere for any major length of time was about 2.3 billion years ago in what is called the Great Oxidation Event. This jump in oxygen levels was almost certainly due to cyanobacteria — microbes that, like plants, photosynthesize and exhale oxygen.

However, recent research examining ancient rock deposits had suggested that oxygen may have transiently existed in the atmosphere 2.6 billion to 2.7 billion years ago.

The new study pushes this boundary back even further, suggesting Earth's atmosphere became oxygenated about 3 billion years ago, more than 600 million years before the Great Oxidation Event. In turn, this suggests that something was around on the planet to put that oxygen in the atmosphere at this time.

"The fact oxygen is there requires oxygenic photosynthesis, a very complex metabolic pathway, very early in Earth's history," said researcher Sean Crowe, a biogeochemist at the University of British Columbia in Vancouver. "That tells us it doesn't take long for biology to evolve very complex metabolic capabilities." [7 Theories on the Origin of Life]

Ancient oxygen reactions

Crowe and his colleagues analyzed levels of chromium and other metals in samples from South Africa that could serve as markers of reactions between atmospheric oxygen and minerals in Earth's rocks. They looked at both samples of ancient soil and marine sediments from about the same time period — 3 billion years ago.


The researchers focused on the different levels of chromium isotopeswithin their samples. Isotopes are variants of elements; all isotopes of an element have the same number of protons in their atoms, but each has a different number of neutrons — for instance, each atom of chromium-52 has 28 neutrons, while atoms of chromium-53 have 29.

When atmospheric oxygen reacts with rock — a process known as weathering —heavier chromium isotopes, such as chromium-53, often get washed out to sea by rivers. This means heavier chromium isotopes are often depleted from soils on land and enriched in sediments in the ocean when oxygen is around. These proportions of heavier chromium were just what were seen in the South African samples. Similar results were seen with other metals, such as uranium and iron, that hint at the presence of oxygen in the atmosphere.

"We now have the chemical tools to detect trace atmospheric gases billions of years ago," Crowe told LiveScience.

'Almost certainly biological'

All in all, the researchers suggest atmospheric oxygen levels 3 billion years ago were about 100,000 times higher than what can be explained by regular chemical reactions in Earth's atmosphere. "That suggests the source of this oxygen was almost certainly biological," Crowe said.

"It's exciting that it took a relatively short time for oxygenic photosynthesis to evolve on Earth," Crowe added. "It means that it could happen on other planets on Earth, expanding the number of worlds that could've developed oxygenated atmospheres and complex oxygen-breathing life."
Future research can look for similarly aged rocks from other places, both on and outside Earth, to confirm these findings. "Research could also look at earlier rocks," Crowe said. "Chances are, if there was oxygen 3 billion years ago, there was likely oxygen production some time before as well. How far back does it go?"

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